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ELISA试剂盒检测结果的三个条件

发布时间:2020/5/27 17:31:28 阅读人数:399

elisa试剂盒检测结果的三个条件:

1、ELISA加样步骤

在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。

制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、血块收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液,再在其加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。

一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液、分泌物和排泄物等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份,ELISA试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。

2、固相载体


加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。每次加标本应更换吸嘴,以发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。

良好的仪器和准确的操纵是保证ELISA试剂盒检测结果正确可靠的必要条件。ELISA顶用的蒸馏 水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。有些标本可直接进行测定,有些则需经预处理。

3、标本因素

血清标本可按常规方法采集,应留意避免溶血,红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。

如在冰箱中保留过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。本文将叙述板式ELISA各个操纵步骤的留意要点,国外试剂均与特殊仪器配合应用,严格遵照划定操纵,必能得出正确的结果。

加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可溅出,不可产气愤泡。有此测定需用稀的血清,可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。




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