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细菌(Bacteria)二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)ELISA检测试剂盒@新新闻动态

型号:48T96T

产品价格:电议      采购度:83      原产地:中国大陆

发布时间:2021/3/23 16:04:31      所属地区:

简要描述:

试剂盒采用双抗体步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值)

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产品详情

细菌Bacteria二磷酸核酮糖羧化酶RuBPCaseELISA检测试剂盒
使用说明书
检测原理细菌(Bacteria)二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)ELISA检测试剂盒@新新闻动态
试剂盒采用双抗体步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包二磷酸核酮糖羧化酶RuBPCase)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的二磷酸核酮糖羧化酶RuBPCase)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度
样品收集、处理及保存方法
1.  样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
2.  标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
3.  细菌萃取液或其它相关样本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测。
4.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。细菌(Bacteria)二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)ELISA检测试剂盒@新新闻动态
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃,使用室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,终结果乘以5才是样本实际浓度。细菌(Bacteria)二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)ELISA检测试剂盒@新新闻动态
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用充分摇匀。
试剂盒组成
名称
96孔配置
48孔配置
备注
微孔酶标板
12孔×8条
12孔×4条
标准品
0.3mL*6管
0.3mL*6管
样本稀释液
6mL
3mL
检测抗体-HRP
10mL
5mL
20×洗涤缓冲液
25mL
15mL
按说明书进行稀释
底物A
6mL
3mL
底物B
6mL
3mL
终止液
6mL
3mL
封板膜
2张
2张
说明书
1份
1份
自封袋
1个
1个
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、5、10、20、40、80pg/ml
试剂的准备
 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤细菌(Bacteria)二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)ELISA检测试剂盒@新新闻动态
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.  样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。细菌(Bacteria)二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)ELISA检测试剂盒@新新闻动态
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
 细菌(Bacteria)二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)ELISA检测试剂盒@新新闻动态
试剂盒性能
1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.  灵敏度:低检测浓度小于1.0 U/L。
3.  检测范围:1.0 - 80 U/L。
4.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
5.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
6.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
7.  有效期:6个月
免责声明
1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2.   严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
 细菌(Bacteria)二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)ELISA检测试剂盒@新新闻动态
 
 

更新时间:2022/1/24 14:16:09

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